通用反相色谱柱的安装可分为多个步骤

栏目:行业资讯 发布时间:2024-12-09
在使用通用型反相色谱柱前,应对其性能进行测试,并将结果记录保存,以便未来评估柱性能的变化。但需注意,柱性能可能因样品、流动相、柱温等条件的不同而有所差异。

在使用通用型反相色谱柱前,应对其性能进行测试,并将结果记录保存,以便未来评估柱性能的变化。但需注意,柱性能可能因样品、流动相、柱温等条件的不同而有所差异。此外,进行柱性能测试时,应按照通用型反相色谱柱出厂报告中列出的条件进行(出厂测试所用的条件为*条件),这样才能确保测得结果具有可比性。


通用反相色谱柱的安装方法:


1、打开柱子包装盒,检查色谱柱的类型、尺寸、生产日期以及柱内所存储的溶剂。


2、将柱两端接头的密封堵头拧下后,妥善放回包装盒以备后用。


3、根据柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀的出口连接(如果条件允许,建议在柱前使用保护柱);同时,将柱的出口与检测器相连。连接管的外径为1.57mm,内径为0.1-0.3mm,材质为不锈钢。连接管的两端各配有空心螺钉和用于密封的压环。在连接时,务必尽量减小柱外的死体积。连接管应通过空心螺钉和压环插入至底部,然后顺时针旋紧空心螺钉,直到无法继续拧动为止,随后用扳手再顺时针拧动1/4至1/2圈,切忌用力过大。如果色谱柱在流动相加压后出现漏液现象,请继续用扳手顺时针拧动1/4圈,直至不再漏液为止。

完成连接后,进行系统的紧密度检查至关重要。这通常涉及以较低的流速(如0.2-0.5mL/min)向色谱系统中泵入流动相,同时观察整个系统,包括连接处、色谱柱以及检测器入口,确保无渗漏现象。若发现有漏液点,应立即停止泵流,仔细检查并重新紧固相应部件,直至完全密封。


接下来,进行色谱柱的平衡。根据待分析样品的特性,选择合适的流动相组成和pH值,以恒定流速泵入系统,让流动相充分浸润色谱柱,此过程一般需持续数小时,以确保柱内达到稳定的吸附-解吸平衡状态。平衡时间的长短可能因柱型、柱温及流动相特性而异。


平衡完成后,即可进行色谱柱的性能验证。通过注入一系列已知浓度和性质的标准品溶液,记录色谱图,评估柱效(如理论塔板数)、分辨率、拖尾因子等关键指标,确保色谱柱满足分析需求。若性能参数偏离预期,需重新检查安装步骤或调整操作条件,直至获得满意的分离效果。


至此,通用反相色谱柱的安装与调试工作全部完成,它已准备好迎接日常分析任务,为科研或生产中的样品分离与鉴定提供可靠支持。