液相色谱柱的柱压升高可能引起的几种原因

液相色谱柱的储存液若无特别说明，一般为评价报告中所列的流动相。在使用前，务必确认储存液与待分析样品的流动相是否能够互溶。在反相色谱中，若使用高浓度的盐或缓冲液作为洗脱剂，应先用约10%的低浓度有机相洗脱剂进行过渡，避免缓冲液中的盐在高浓度有机相中析出，从而堵塞色谱柱。

液相色谱柱的几种原因可能导致柱压升高。

1、流动相的预处理

杂质堵塞了色谱柱的入口滤片，导致压力增加。这通常是因为流动相没有经过过滤，或尽管已经进行了过滤，但过滤效果不够，导致固体杂质滞留在滤板上。

2、样品的沉淀

当样品的溶剂与流动相不匹配时，样品进入色谱柱后，有时会因为溶解度降低而出现沉淀，从而导致压力升高。

3、晶体的析出

在使用含缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会在体系中留下残余。这些无机盐由于在新流动相中的溶解度降低而会析出，从而导致流体阻力增加和压力升高。

4、细菌或霉菌滋生

霉菌可能在流动相、管道或柱子入口处滋生并繁殖，进而阻塞滤板，导致压力升高。因此，使用磷酸盐缓冲液时通常建议现配现用。

5、溶质吸附

当溶质在柱子上被强烈吸附，并且所用的流动相难以将其洗脱时，未被洗脱的溶质累积会导致阻力增加和压力上升。

6、流动相更换的速度过于频繁

在改变流动相体系时，不同性质且互不混溶的流动相的替换，会导致它们共存于同一体系中，从而引起压力升高。

7、压力脉冲

在运行过程中，有时会出现系统内压力的突然波动。这种压力脉冲可能导致多孔填料的破损和柱床结构的细微变化，而填料微屑的长期积累也可能导致柱床阻力增加，从而使压力上升。

针对上述导致液相色谱柱柱压升高的原因，我们可以采取一系列预防与解决措施来确保色谱柱的正常运行和延长其使用寿命。

首先，加强流动相的预处理至关重要。应确保所有流动相在使用前均经过适当过滤，推荐使用高质量的滤膜，如0.45μm或更小的孔径，以有效去除杂质。同时，定期检查并更换过滤器，防止因长期使用而降低过滤效率。

其次，针对样品的沉淀问题，应在进样前对样品进行预处理，如稀释、调整溶剂或使用适当的样品前处理技术，以确保样品与流动相兼容，减少沉淀生成。此外，选择合适的溶剂清洗色谱柱，以去除可能残留的沉淀物。

对于晶体析出的情况，除了使用新鲜配制的缓冲液外，还可以考虑在流动相中加入适量的添加剂，如有机溶剂或表面活性剂，以提高无机盐的溶解度，减少析出风险。

在防止细菌或霉菌滋生方面，保持系统清洁干燥是关键。定期对色谱系统进行清洗和消毒，使用无菌的流动相和容器，避免在长时间不使用时将流动相留在系统中。

针对溶质吸附问题，可以尝试优化流动相组成，使用更强的洗脱剂或改变洗脱条件，以确保溶质能被有效洗脱。此外，选择合适的色谱柱和填料类型，根据分析物的性质进行匹配，也能减少吸附现象。

最后，在更换流动相时，应缓慢过渡，避免直接切换，以减少不同流动相之间的相互作用和压力波动。同时，定期检查色谱系统的密封性和稳定性，及时发现并解决潜在问题，如泄漏、堵塞等，确保系统稳定运行。通过这些措施的综合应用，我们可以有效降低液相色谱柱柱压升高的风险，提高分析结果的准确性和可靠性。