色谱柱反冲真的有用吗?

栏目:行业资讯 发布时间:2024-06-24
那么,今天我们就来分析讨论一下!色谱柱到底能不能反冲,以及背后的原因是什么?

液相色谱柱能够反冲?

这是很多用液相色谱技术人员的一个疑问。


看到有小伙伴说,如果色谱柱柱头堵了,压力升高了,反冲完的效果也不错。


也有小伙伴说,厂家说不建议反冲,冲了会影响柱效!!!


那么,今天我们就来分析讨论一下!色谱柱到底能不能反冲,以及背后的原因是什么?



Q

当色谱图峰型变差或仪器压力过高时,我们会使用不同溶剂对色谱柱进行反向冲洗,虽然看到了一些改进,但效果并不稳定。我们该如何改进呢?

答:作为色谱柱生产厂家,小研并不提倡反向冲柱。大多数情况下,反向冲柱并不起作用,而当我们认为它起作用时,也可以通过更合理的方式来改善。

什么情况下我们需要尝试对色谱柱反向冲洗?原因可能有:由于流动相或 HPLC 仪器中的样品成分或碎屑堆积在柱头导致的压力升高、色谱柱性能显著下降

如果碎屑足够多,就会聚集在色谱柱过滤片的外表面,导致过滤片损坏,这种情况下,更换过滤片与反向冲洗的效果是一样的。

色谱柱构造示意图

不过,根据小研的经验,过滤片损坏的问题是比较少发生的,一般是色谱柱柱头被污染物污染并吸附堵塞,导致色谱柱压力升高。当污染物分子量较大或溶解度较低时,会堵塞色谱柱内填料之间的通道,而第一层填料受到污染物的作用力最大,填料层被挤压重新排列、变形,甚至塌陷,最终导致峰形恶化。要修复这种填料结构内部的损坏是非常困难的,甚至是不可能的,反向冲洗色谱柱充其量只是一场赌博。

Q

反向冲洗可能不是一个很好的解决方案,但确实有帮助,至少可以让色谱柱的寿命更长一些?


答:反冲色谱柱有一点帮助但不多,小研喜欢更可靠、更持久的解决方案——保护柱

保护柱通常是指安装在进样器和分析柱之间的小短柱,通过预先捕集能被分析柱牢固吸附,不能被流动相所洗脱的物质,保护并延长分析柱使用寿命。

保护柱就像是疫情期间必备的口罩,把病毒阻挡在人体外面,流动相和样品里如有什么损害柱子的污染物,保护柱就自己承受,不会让其进入分析柱。



Q

市场上有许多不同的保护柱。我应该使用哪一种?


答:保护柱很重要,但选择合适的保护柱更重要,选择或使用不当也可能带来截然相反的效果。保护柱的填料,要与分析柱保持一致!填料品牌一致,才能100%确保选择性一致


此外,保护柱的规格,要与分析柱匹配!填料粒径一致,保护柱的内径与分析柱的内径相近。对于精细分离,保护柱本身的装填柱效要足够好!

保护柱建议专柱专用,避免保护柱成为不同项目的交叉污染源。当峰的理论塔板数下降15%,或是柱压上升15%,或是关键分离度下降15%时,都应该及时更换保护柱。
好消息!

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总结
手性色谱柱娇贵,需要严格按照说明书使用反冲是不建议的!
知其然、知其所以然、知其所以必然。今日小研分享的知识就先到这啦,希望能对你们有所帮助!