导致液相色谱柱压力上升的原因有哪些？

液相色谱柱的存储液，如果没有特别说明，都是根据评价报告所指出的流动相。在使用之前，请务必确保液相色谱柱的存储液与待分析样品的流动相是否相容。对于反相色谱，如果使用高浓度的盐或缓冲液作为洗脱剂，应首先用约10%左右低浓度的有机相进行洗脱，以过渡一下，否则缓冲液中的盐会在高浓度的有机相中析出，从而导致色谱柱堵塞。

液相色谱柱升高压力的原因有以下几种：

1、前置处理的移动阶段

进口滤片会堵塞色谱柱中的杂质，从而使压力升高。这通常是由于流动相没有经过滤或虽然经过滤但过滤效果不佳，导致固体杂质停留在滤片上引发的。

2、样品的沉淀

当样品的溶解液与流动相不相容时，进样进入色谱柱后，有时会由于溶解度下降而发生沉淀，导致压力升高。

3、晶体的析出

在使用含有缓冲液的移动相时，缓冲液中的无机盐有可能会保留在体系中，当它们在新的移动相中的溶解度降低时会析出，导致流体阻力增加和压力上升。

4、微生物滋生

霉菌会在流动系统、管道或柱子的进口处繁殖生长，堵塞过滤板，增加压力。因此，使用磷酸盐缓冲液时通常需要现配现用。

5、溶质吸附

当溶质在柱子表面有很强的吸附能力，并且使用的流动相难以将其清洗干净时，未被清洗的溶质会不断积累，导致阻力增加和压力升高。

6、流动相更换速度较快

当改变流动相体系时，即使不进行更换操作，不同性质且无法相互混合的流动相出现在同一体系中，都可能导致压力增加。

7、压力脉冲

系统运行时，可能会出现突然的内部压力变化。这种压力脉冲会导致多孔填料破裂和柱床结构微小变形，同时填料微屑长期积累也可能导致柱床阻力上升，从而增加压力。