手性色谱柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。手性色谱柱在使用过程中可能会遇到以下常见问题:
1、柱压值增加将会提高手性色谱柱的效果。
手性柱压力升高的原因可能是由于流动相中醇含量过高,或液相通路受阻,或柱顶沉淀有样品,又或填料被压缩导致柱顶坍塌等。针对不同原因应有针对性的措施。若是醇含量高,可调整温度或流速。若液相通路堵塞,则需清理。如柱顶沉淀有样品,则需使用流动相溶解样品及预处理以去除易沉淀成分。填料被高压压缩而导致柱顶坍塌,则需更换新手性柱。
2、手性柱屏谱中异构体分离效果降低
分离效果降低的原因可能是由于色谱条件发生变化,或者柱效受损。首先要检查是否外部因素如温度、流动相等发生了变化,导致分离效果下降,若排除了外部因素,则可能是柱效下降所致。若分离效果在短时间内急剧下降且柱压升高,可能是由于极性溶剂损害了柱子;若分离效果在较长时间内逐渐下降,可能是由于柱头污染或崩塌,需更换保护柱或分析柱。
3、手性柱的使用寿命较短
手性柱的使用寿命受到多种因素的影响,如流动相的成分、样品的性质、色谱条件等。为了延长手性柱的使用寿命,我们应该注意以下几点:首先,避免使用强酸、强碱等极端pH值的流动相,因为这些条件可能会破坏手性固定相的结构。其次,尽量避免使用高浓度的有机溶剂,尤其是极性溶剂,因为这些溶剂可能会溶解固定相。最后,定期对柱子进行清洗和维护,以保持其良好的工作状态。
4、手性柱的分辨率不足
分辨率是衡量手性柱性能的重要指标之一。如果手性柱的分辨率不足,可能是由于柱温过高、流动相流速过快、样品浓度过高等原因所致。为了提高手性柱的分辨率,我们可以尝试降低柱温、减小流动相流速、降低样品浓度等方法。此外,还可以通过优化色谱条件,如改变流动相组成、添加添加剂等,来提高分辨率。
总之,手性色谱柱在使用过程中可能会遇到各种问题,我们需要了解这些问题的原因和解决方法,以确保手性色谱柱的正常使用和分离效果。同时,我们还应该注意维护和保养手性柱,以延长其使用寿命和提高分离效果。