液相色谱柱是由柱管、压盖、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头和螺丝等组件构成的。柱管通常采用不锈钢制造,压力较低时也可以使用厚壁玻璃或石英管,内壁要求非常光滑。为了提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁经常进行抛光处理。有些人还会在不锈钢柱内壁涂上氟塑料,以提高内壁的光滑度,其效果与抛光相同,此外,还有使用熔融硅或玻璃衬里的色谱柱,专用于细直径柱。
色谱柱两端的接头内部安装有筛板,通常由烧结不锈钢或钛合金制成,具体材质取决于填料的粒度,目的是防止填料溢出。柱内径一般根据柱长度、填料粒径和折合流速来确定,以避免管壁效应。
液相色谱柱是否封端会对检测结果产生哪些影响?
由于空间位阻效应,较大的硅烷分子无法与载体表面上较小的硅羟基完全反应,因此会存在残留的羟基。而且,当使用双或三官能团的硅烷化试剂时,还会形成新的硅羟基。
残留的羟基,尤其是在反相填料中,对产品性能有显著影响。它能减弱表面的疏水性,对极性化合物,尤其是碱性溶质会发生二次化学吸附。而残留羟基浓度的改变则是导致产品性能不稳定的重要原因之一。
因此,在改进键合反应本身的同时,一般需要在键合反应结束后使用三甲基氯硅烷或六甲基二硅胺等小分子硅烷进行处理,也就是所谓的封端,以减少残留的硅羟基含量,这对提高键合填料的稳定性至关重要。
另外,还有一些色谱柱不进行封尾处理,使其与水系统的流动相更具有良好的“湿润”性能,在特定条件下可以更好地分离分析一些极性化合物。