手性柱拆分的方法和注意事项

栏目:行业资讯 发布时间:2021-11-08
手性柱拆分的方法和注意事项.。手性色谱柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。

  手性柱拆分的方法和注意事项.。手性色谱柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)。

手性柱

  一、手性柱拆分的方法

  1、一般有HPLC和SFC两种方法,通过不同的体系搭配专用的手性色谱柱将目标产物分离出来,这其中就涉及到手性化合物的方法开发。

  2、对于一种手性化合物,开发一种新的拆分方法,会涉及到很多方面,选择哪种体系(HPLC/SFC)?色谱柱?流动相?都要考虑进去。

  3、就目前而言,SFC体系是拆分手性化合物的首选,其相对于HPLC体系而言有更好的选择性和分离效果,同时也更高效,因为SFC体系采用的是超临界流体CO2和有机试剂,搭配手性色谱柱,对手性化合物有很强的的选择性和分离效果。

  4、对于SFC体系,因为其采用的是超临界CO2和有机试剂(改性剂)作为流动相,所以想要开发出合适的分离方法,其中要考虑到改性剂的选择、手性色谱柱的选择、温度的控制、添加剂的选择。

  二、手性柱的注意事项

  1、流动相中任何时候不能含有无机酸,无机碱,不可用不含铜离子的盐,否则将损坏色谱柱。

  2、流动相一定要采用预混合方式走等度,在线混合方式将损坏色谱柱。样品一定要用水或流动相溶解。

  3、流动相中硫酸铜的浓度发生变化时或体系发生变化时,色谱柱要重新平衡2小时以上。

  4、避免在pH低于4.0或高于7.0的条件下使用色谱柱。

  5、最高操作温度为60°C。尽量在50°C以下使用。

  手性色谱柱相对于其他C18等色谱柱而言,价格昂贵,但是其对手性化合物的分离有很强的选择性,目前一般有两种类型:涂敷型和键合型,其中的四大金刚柱可以将80%以上的手性化合物进行分离,剩余的可以用其他手性色谱柱进行尝试。