正相手性柱常见问题与流动性注意事项。用来分离手性物质的色谱柱就叫做手性柱。与常规色谱柱比较而言,其专属性比较强。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。下面就来看看它的常见问题和流动性注意事项介绍。
一、手性柱常见问题
1、手性柱谱图中异构体的分离度下降了,这可能是什么原因,该怎么办?
分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱受损柱效发生了变化。首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降,如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。
2、正相手性色谱柱柱压高了怎么办?
手性柱压力高的原因有可能是流动相中醇的含量太高,或者液相流路中有堵塞,或者柱头有样品析出,或者填料被压缩柱头塌陷等。针对不同的原因请有针对性的采取相应的措施。如果是流动相中醇含量太高,则需要升高温度或者降低流速。
3、正相手性柱进了水后,柱子会不会损坏?
Chiralomix SD手性色谱柱,Chiralomix SC手性色谱柱,Chiralomix SB手性色谱柱,Chiralomix SA手性色谱柱,一旦进了水,柱压会升高,但是只要柱压不超过柱压上限,柱子就不会损坏。只需用无水乙醇低流速(0.1-0.2 ml/min)将水全部充分置换出来,再用正相流动相低流速(0.1-0.2 ml/min)将乙醇全部置换出来就能继续使用该正相手性色谱柱。
二、手性柱的流动性注意事项
1、流动相中任何时候不能含有无机酸,无机碱,不可用不含铜离子的盐,否则将损坏色谱柱。
2、流动相一定要采用预混合方式走等度,在线混合方式将损坏色谱柱。样品一定要用水或流动相溶解。
3、流动相中硫酸铜的浓度发生变化时或体系发生变化时,色谱柱要重新平衡2小时以上。
4、避免在pH低于4.0或高于7.0的条件下使用色谱柱。
5、最高操作温度为60°C。尽量在50°C以下使用。
6、推荐流动相为2mM的硫酸铜水溶液:异丙醇=95:5(V/V)。流动相中异丙醇的比例不能超过15%,过大比例会导致色谱柱的损坏。
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