一起来看看手性柱的使用方法与注意事项。手性柱就是用来分析或者是制备手性化合物的色谱柱,也同样分正相和反相,然后根据填料不同可以分为环糊精手性柱、纤维素衍生物手性柱、配体交换手性柱等各种各样的类型。下面就来看看它的使用方法与注意事项。
一、手性柱使用方法
1.、若RP-HPLC用到过缓冲液的话,先换成纯水,按照C18柱的使用维护方法,将普通色谱柱洗好,然后在进行封柱。
2.、卸下常规反相C18柱后,直接用两通代替色谱柱将两部分管路连接起来,需用的2个通道都塞到水中,先用水洗干净去带走(可能用到的)缓冲液和乙腈(或者甲醇),然后同样地用异丙醇洗去带走水。最后再换上正相模式下的流动相(正己烷-异丙醇/乙醇)。
3、接上手性柱,要先预设定一个分离的条件,那就是平衡色谱柱,平衡好后才进样分析,
二、手性柱的注意事项
1、样品检测前需仔细询问送样人员样品中可能含有的溶剂,如果工艺中用到丙酮、氯仿、DMF、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF,则需尽量烘干。样品尽量溶解在流动相中,并用μm滤膜过滤。切记不能用强碱性物质作为流动相添加剂或溶解样品,因为这样子会损坏手性柱填料中的硅胶成分。
2、如果系统中或者色谱柱中含较高浓度的异丙醇或者乙醇时,由于他们的粘度比较大,在使用平衡色谱柱的时候需要特别注意压力变化,可采用低流速平衡,当柱压下降后再逐渐升高至自己所需要的流速。
3、样品检测完毕,用100%无水2醇清洗色谱柱,以min冲洗3个小时。用100%无水乙醇柱压会比较高,所以流速不能过高,冲洗过程中注意压力变化,如果是超过50bar,则最好把流速降至min,并且可以适当的延长冲洗时间。
4、大多数手性毛细管柱的固定液是环糊精改性物。环糊精连上不同官能团就具备了不同的极性,要选择柱子的话,先确定你要做的产物类型,然后选择分离效果最好的环糊精固定液类型,
以上就是手性柱的使用方法与注意事项了,手性柱的使用方法也不止与这些,想要了解更多关于手性柱的资讯,欢迎致电研创生物进行咨询。