关于氨基柱的使用技巧介绍

　　液相色谱柱的固定相可以说是五花八门，有C18，C8，C4，苯基柱，氰基柱，氨基柱等等。色谱柱使用的好坏，直接关系到分析分离的结果，我们都知道氨基柱有使用寿命短等问题，今天在这里给大家带来氨基柱的使用维护指南，希望通过更好的维护使用，让我们手中的色谱柱发挥出更大的作用。

　　说起氨基柱，大家熟悉的是拿它来做糖的分析。这是一个典型的HILIC模式。除了HILIC模式以外，氨基柱还可以用做正相和弱阴离子交换两种模式。可以说应用范围和模式非常广。

　　说了这么多我们看看下面该如何使用维护。

　　新色谱柱如果使用HILIC模式，使用前请使用异丙醇小流速过夜平衡色谱柱。流速建议0.1mL/min,之后再转换到100%乙腈冲洗20柱体积，然后转换到和流动相相同比例的不含盐的乙腈水体系冲洗20柱体积。

　　冲洗

　　用乙腈：水=60:40条件对色谱柱进行清洗，清洗时，不建议水相比例超过40%，过高使用水相容易导致键合相水解。

　　色谱柱再生

　　当色谱柱经过长时间使用，柱效很低时，可以对色谱柱再生处理，用乙腈：水（水中加入0.05%氨水）=60:40条件冲洗30柱体积。

　　保存

　　一个月以内的保存，请使用与所选用流动相组成相同的有机溶剂和水的混合溶液（不含酸、无机盐）进行置换，请避免只用水进行置换；一个月以上的长期保存，在进行了上述处理之后，请用乙腈置换并保存。

　　氨基柱糖类的分析

　　1、请设定乙腈/水的流动相条件。乙腈的浓度越高，则对糖的保留能力越强。

　　2、若采用含甲醇或缓冲盐的流动相，峰会展宽。

　　3、若将糖的水溶液作为样品注入，谱峰会展宽。请使用含乙腈50%以上的溶剂来配制糖类样品。

　　4、曾在酸性条件下使用过的色谱柱，糖类分析的保留时间、峰形会发生变化。

　　离子型物质的分析

　　1、请设定乙腈/磷酸缓冲液且具有一定pH值的流动相条件。

　　2、考察流动相条件时，按照pH由高到低的顺序进行考察。如果曾经在低pH下使用，填料的表面将无法回到初始状态。

　　3、有时需要长时间平衡色谱柱（24小时以上）。平衡所需时间与通液量和盐浓度紧密相关，因此，时间紧急时请提高流速，或pH不变而增加流动相的盐浓度来进行平衡。