影响色谱柱性能的物理参数有哪些？

　　随着HPLC的普及，分析方法学的开发成为一个合格的分析研究员的标配，而色谱柱的筛选是分析方法开发的第一步，也是最重要的一步，优秀的分析研究员可以根据化合物的结构特征很快确立所需的色谱柱，然后根据化合物的Pka，logP确立流动相。那影响色谱柱性能的物理参数有哪些？

　　(1)硅胶纯度

　　硅胶纯度和残留金属离子浓度，硅胶的杂质会影响化合物的峰形，硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形，易发生拖尾。

　　(2)色谱柱尺寸

　　填料床的长度和内径，增加色谱柱长度，可以在一定程度上提高柱效，但也会升高压力和导致峰展宽；宽柱径，提高载样量，但也会增加横向扩散，同样会导致峰展宽。窄柱径可以节约溶剂，可减少横向扩散，但压力较大，对系统要求较高。

　　(3)颗粒形状及粒径

　　球形颗粒柱效高、重现性好、柱床结构均匀，不规则形柱床结构不均匀、流动相线速度不均匀，容易谱带展宽；平均颗粒直径，粒径越小，柱效越高，柱压也越高。粒径分布越广则柱效越低，压力越大。

　　(4)颗粒表面积

　　颗粒外表面和内部孔表面的总和，以m2/g表示，相对而言高表面积对样品具有较强的保留能力，更大的柱容量和分离度。而低表面积能更快达到平衡状态，更适合梯度洗脱程序。

　　(5)孔径

　　颗粒的孔或腔的平均尺寸，范围是80~300Å，大孔径的填料颗粒可以延长大分子溶质在填料表面的滞留时间，改善分离，所以大孔径填料适合分离大分子化合物或者水动力体积较大的分子。