HPLC分离度不够？7大实用技巧帮你轻松搞定！

在高效液相色谱（HPLC）分析中，目标峰分离度不足是实验室常见的“头疼问题”。分离度差不仅影响数据准确性，还可能导致结果误判！别担心，本文总结了7大核心解决方案，从流动相优化到仪器维护，手把手教你拯救重叠峰！

分离度（Resolution, Rs）是衡量色谱峰分离效果的核心指标，通常要求Rs≥1.5。当Rs不足时，可能是以下原因导致：

• 色谱柱性能下降（柱效低、填料污染）

• 流动相选择不当（pH、有机相比例、添加剂不匹配）

• 方法参数不合理（流速、温度、梯度程序）

• 样品过载或基质干扰

1. 流动相：从“配方”入手提升选择性

• 调整有机相比例：
  增加乙腈/甲醇比例可缩短保留时间，反之延长。通过微调比例（如±5%），拉开目标峰与干扰峰的间距。

• 精准控制pH值（针对可电离化合物）：
  酸性物质：降低pH抑制电离，增强保留；
  碱性物质：升高pH促进电离，改善分离。

• 巧用添加剂：
  添加离子对试剂（如0.1%三氟乙酸）或缓冲盐（如磷酸盐），增强极性化合物分离。