一文读懂色谱柱质量过载与体积过载

液相色谱柱的过载是指在色谱分析过程中，由于样品量或样品浓度过高，使得色谱柱内的分离效果受到影响，甚至导致分离失败。色谱柱的过载可以分为质量过载和体积过载，以下是对这两种过载的详细解读：

定义：质量过载又称为浓度过载，是指在小体积进样时（体积未过载），由于进样浓度较高，靠近谱峰峰带的固定相被饱和，即进样某一组分超过了色谱柱的载样量而出现过载的现象。

定义：体积过载是指进样体积过大，造成柱子的体积超载。

表现：通常会导致较宽的平头峰。随着进样体积的增大，峰宽逐渐变宽，峰分离度降低。另外，体积过载还会影响峰保留时间，对保留时间短的组分影响更大，而对于较后面流出的峰影响较小。

解决方法：为选择合适的进样体积，需要计算在最佳流速下允许样品进样的最大体积。最大体积的计算公式为：

其中:L为柱长（mm），dc为内径（mm），dp为粒径（μm）。如果小伙伴嫌弃公式太繁琐，也没有关系，贴心的小编已经把我们常用的各规格色谱柱列出：

尽管上表中各个数据是严格按照公式计算出来的，但是这个数据并不绝对。色谱是经验科学，较之其他学科需要更多的实践。当然，理论也为我们指引了方向，让我们能少走弯路。

色谱柱的质量过载和体积过载都会对色谱分析结果产生不良影响，包括分离效果降低、保留时间变化以及检测器响应降低等。为了避免这些不良影响，需要根据色谱柱的承受能力和样品的浓度合理调整进样量和进样体积，同时选择合适的色谱柱和优化分析方法也是预防色谱柱过载的有效措施。此外，定期对色谱柱进行清洗和保养也是保证其分离效果和使用寿命的重要步骤。