高效液相色谱基线“暴走”，五大因素及破解之道大公开

原因：色谱柱在更换流动相或长时间未使用后，需要一定的时间来达到平衡状态。在平衡过程中，基线可能会出现波动。

解决方法：使用中等强度的溶剂冲洗色谱柱，特别是在更换流动相时，应先用10到20倍体积的新流动相进行冲洗，以确保色谱柱充分平衡。

原因：色谱柱中的气泡会影响流动相的流动性和色谱峰的形状，从而导致基线不稳定。

解决方法：在检测器的水池出口加负压调节器，以减少气泡的生成。同时，检查色谱柱的连接处是否紧密，防止空气进入。

原因：流动相中的溶解气体会在色谱柱内析出，形成微小气泡，影响基线稳定性。

解决方法：对流动相进行超声波脱气处理，时间一般为15-30分钟。或者通过充氮等方式去除溶解气体。

原因：流动相的配比或流速的变化会直接影响色谱峰的分离效果和基线稳定性。

解决方法：根据实验需求调整流动相的配比和流速，并定期检查流动相的组成及流速，确保其稳定性。

原因：如果检测器的波长没有设置在样品的最大吸收波长处，会导致基线不稳定。

解决方法：将探测器的测试波长调整到样品的最大吸收波长处。

原因：长期使用后，检测器内部可能会积累污染物，影响基线稳定性。

解决方法：定期清洗检测器，去除污染物。可以使用甲醇或其他强极性溶剂进行冲洗。

原因：柱温的微小变化都可能引起基线的波动。

解决方法：控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器来稳定温度。

原因：系统中可能存在漏液点，导致流动相流失和基线不稳定。

解决方法：检查管路接头是否松动、泵是否漏液等，确保系统密封性良好。