手性化合物: 手性化合物(chiral compounds)是指分子量、分子式相同,但空间结构排列相反,如实物与其镜中的映体。人的左右手结构相同,大拇指至小指的次序也相同,但顺序不同,左手是由左向右,右手是由右向左,所以叫做“手性”。也就是指一对分子,由于它们像人的两只手一样彼此不能重合,称为手性化合物。 手性分离: 手性分离(chiral separation)是化学工程中的一个重要概念,它指的是将具有手性特征的分子(即手性分子)从其混合物中分离出来的过程。手性分子是指那些在镜像成像下不能完全重合的分子,它们具有两种非对称的空间排列方式,互为对映异构体。由于手性分子在物理和化学性质上可能存在显著差异,特别是在生物活性方面,因此手性分离在药物化学、农业科学、食品工业等领域具有重要意义。
适用场景:样品溶于非极性溶剂,如烷烃类。 流动相组合:常用的有烷烃类(如正己烷)和醇类(如乙醇、异丙醇)。醇类起洗脱作用,烷烃类调节洗脱强度。 特点:分离过程相对稳定,适用于多种手性固定相。 在手性色谱中,为改善目标物的峰形,需要在流动相中添加酸或者碱。如果目标物是酸性化合物,往往要在流动相中加入酸性添加剂,如三氟乙酸、乙酸、甲酸等。如果目标物是碱性化合物,要在流动相中加入碱性添加剂,如二乙胺、三乙胺、丁胺、乙醇胺等。酸性或碱性添加剂的加入量一般为0.1%~0.3%,最大不超过0.5%,要注意色谱柱的pH耐受范围。 注意:正相色谱柱在使用含酸/碱添加剂的正相流动相后,需用正己烷/异丙醇=90/10 冲洗色谱柱 30 min,然后用正己烷/异丙醇=90/10 封存。
适用场景:样品溶于含水极性溶剂,如甲醇、乙醇等。 流动相组合:有机相(如乙腈、甲醇)和水相(如磷酸盐缓冲液或纯水)。有机相比例越高,目标物保留时间越短。 特点:分离速度快,适用于对分离速度有较高要求的场景。 注意:反相色谱柱在使用含酸/碱添加剂的反相流动相后,需用乙腈/水=90/10 冲洗色谱柱 30 min,然后用乙腈/水=90/10 封存;使用含缓冲盐流动相后,需要用不含缓冲盐同比例流动相冲洗色谱柱 30min,然后用乙腈/水=90/10 封存。
溶解性:确定样品溶于何种溶剂,是选择分离模式的基础。 极性:样品的极性也是选择分离模式的重要考虑因素。
匹配性:选择与样品性质相匹配的固定相,以提高分离效率和效果。 适用性:了解不同固定相在不同分离模式下的表现,选择最适合的固定相。
分离度:根据目标化合物的分离度要求,选择合适的分离模式和条件。 分离速度:考虑实验周期和效率,选择适合的分离速度。
流动相比例:通过调整流动相中各组分的比例,优化分离效果。 流速和温度:调节流速和柱温,以改善分离度和峰形。
案例一:氢溴酸西酞普兰的测定,通过正相分离模式,显著提高分离速度和效率。 分离条件: 样品名称/批号:氢溴酸西酞普兰 仪器型号:赛默飞U3000 色 谱 柱:EnantioPak®Y1 溶 剂:乙醇 规 格:250*4.6mm,5μm 柱 温:30℃ 进 样 量:5μL 波 长:237nm 流 速:0.8mL/min 流 动 相:正己烷(0.1%DEA):异丙醇 谱图: 案例二:卡洛芬的测定,通过反相分离模式,显著提高分离速度和效率。 分离条件: 样品名称/批号:卡洛芬 仪器型号:赛默飞 U3000 色 谱 柱:EnantioPak®Y4-R 溶 剂:乙醇 规 格:250*4.6mm,5μm 柱 温:25℃ 进 样 量:5μL 波 长:254nm 流 速:1.0mL/min 流 动 相:乙腈:水(0.1%FA) 谱图: 如上所示,用广州研创的手性色谱柱进行拆分时,柱效和峰面积效果都很好,可以满足市场上的大部分要求。各位小伙伴有手性样品分离或需要筛选柱子,欢迎联系、咨询:18922204825/020-32051815。 结语: 手性分离模式的选择是手性化合物分离中的关键环节。通过了解样品性质、固定相类型以及分离目标和要求,结合实验条件的优化,我们可以精准选择适合的分离模式,提升分离效率和效果。希望本文能为您在手性领域的研究和应用提供有益的参考和帮助。