今天研创生物小编和大家分享一下手性色谱柱的安装步骤,让我们一起来了解一下吧。
步骤1:检查气体过滤器、载气、进样垫和衬管,检查进样垫和气体过滤器,确保辅助气体和探测器的气体畅通有效。如果以前做过沸点较高的化合物,则需要清洗或更换进样。
步骤2:在柱上安装螺母和卡套,仔细将色谱柱两端切平,在手性色谱柱一端安装相应的螺母和卡套。此时,手性色谱柱端口没有前后之分,色谱柱支架的支撑部分应始终朝向柱箱门。
安装螺母和夹套后,将色谱柱端口切平,用放大镜检查,确认切口与管壁成直角,无残留碎屑,无毛刺或不均匀切割面。
步骤3:将手性色谱柱连接到进样口。一般来说,色谱柱的顶部应保持在进样口衬管的中下部。当进样针穿过垫片时,*插入进样口后,如果针尖与衬管中色谱柱顶部相差1-2cm,这是理想的状态。
从手性色谱柱架上取出要连接的足够长度,并按步骤2切割柱,连接到进样口。
避免用力弯曲和挤压毛细柱,小心不要让标志和其他边缘锋利的物体与色谱柱接触和摩擦,以防止柱体断裂或损坏。
将手性色谱柱正确嵌入进样口后,用手拧紧连接螺母,用手拧紧,用扳手再拧1/4-1/2圈。
步骤4:连接载气,载气必须为高纯氮气(或氦气),纯度为99.999%。使用极性柱时(如FFAP、PEG-20M等),载气加脱氧管进一步脱氧,可延长柱子的使用寿命。
当色谱柱与进样口连接时,将载气连接起来。调整柱前的压力,以获得适当的载气流速。将色谱柱的另一端(空端)插入装有己烷的样品瓶中。正常情况下,我们可以看到瓶中稳定连续的气泡。
如果没有气泡,需要重新检查载气装置和流量控制器是否安装或者设置正确,检查整个气路是否泄漏。所有问题解决后,从瓶中取出色谱柱端口,擦拭干净,确保柱端口无溶剂残留,然后进行下一步安装。
步骤5:将手性色谱柱连接到检测器上,其安装和注意事项与上述色谱柱与进样口连接(步骤3)大致相同。安装时,注意色谱柱末端高于尾吹点,或按色谱仪说明书安装。
步骤6:气体检漏在色谱柱加热前,要对气体进行检漏GC系统检漏。检查建议使用1∶1异丙醇/水的混合溶液。
步骤7:色谱柱老化,色谱柱安装及系统泄漏检测完成后,色谱柱可进行老化。将色谱柱程序加热到使用温度的30℃以下,恒温30分钟。这样,柱内吸附的成分就会被吹出,以免影响您的分析。
最后,将手性色谱柱的温度降低到所需的温度,进行实际样品分析。