手性色谱柱的八个维护方法分享

手性色谱柱的正确使用和维护非常重要。稍有不慎就会降低柱效，缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，应注意以下问题，以维护手性色谱柱。

1.避免压力和温度的急剧变化和任何机械振动。温度的突然变化或色谱柱从高处脱落会影响柱内的填充状态；柱压的突然升降也会冲动柱内的填料。因此，调节流速时应缓慢进行，阀门进样时不宜过慢旋转。

2.溶剂的组成应逐渐改变，特别是在反相色谱中，不能直接从有机溶剂改为全水，反之亦然。

3.一般来说，色谱柱不能反冲。只有当生产者指示柱可以反冲时，才能反冲去除留在柱头上的杂质。否则，反冲会迅速降低柱效。

4.选择合适的流动相(尤其是流动相)pH)，为了避免固定相的损坏。有时，预柱可以连接到进样器前面。当分析柱与硅胶键合时，预柱为硅胶，使流动相在进入分析柱前提前被硅胶覆盖“饱和”避免分析柱中的硅胶基质溶解。

5.经常用强溶剂冲洗手性色谱柱，去除柱内保留的杂质。清洗时，流路系统中流动相的置换应逐渐用混溶溶剂过渡，每个流动相的体积应为柱体体积的20倍左右。

6.保存色谱柱时，柱内应充满乙腈或甲醇，柱接头应拧紧，防止溶剂挥发和干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内过夜或更长时间。

7.在使用手性色谱柱的过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片堵塞，应更换滤片或取出清洗；另一种可能是大分子进入柱内，污染柱头；如果柱效率降低或色谱峰变形，柱头可能塌陷，死体积增大。在后两种情况下，小心拧开柱接头，用干净的小钢取出柱头填料1~2mm高度(注意清除污染填料)，然后整平柱内填料。然后用适当的溶剂湿润固定相(与柱内相同)填充色谱柱，压平，再拧紧柱接头。后柱效率提高，但难以恢复到新柱水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前安装与分析柱固定相同的短柱(5~30mm)，能起到保护、延长柱寿命的作用。使用保护柱会失去一定的柱效，这是值得的。正确使用时，色谱柱的使用寿命一般可达2年以上。以硅胶为基质的填料只能用于硅胶填料pH=在2~9范围内使用。柱子使用一段时间后，柱顶可能会保留一些吸附性强的物质，特别是一些有色物质更容易看到被吸入柱顶的填料。

8.新色谱柱使用一段时间后，柱顶填料可能会塌陷，降低柱效。此时，还可以添加填料来恢复柱效。每次工作结束后，最好用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如，ODS柱子应该用甲醇冲洗到基线平衡。当使用盐缓冲溶液作为流动相时，使用后应使用无盐流动相进行冲洗。含卤素元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不应长期接触。HPLC仪器上的柱子如不常用，应每4~5天开机冲洗15分钟。