一般反相液相色谱柱以乙烯醇共聚物为基质,即使碳含量高,也能保持表面湿润。多孔结构平均孔径足够大,对小分子化合物、多肽和小分子蛋白有理想的分离效果。
在有机溶剂比例较高的流动相中,柱具有与硅胶基质色谱柱相同的柱效应,但在碱性缓冲溶液为流动相的情况下,其分离效率超过硅胶色谱柱。其中一个显著的特点是基质烷基填料的洗涤顺序,其保留能力与碳链的长度成正比。
通用型反相液相色谱柱堵塞如何解决?
如果遇到堵塞,首先要确定堵塞是什么原因造成的。如果是色谱柱中残留的缓冲盐造成的,是轻微堵塞。你可以试着在高温下用高比例的水冲洗色谱柱。
如果色谱柱因样品原因堵塞,应考虑另一种方法。如果样品中吸附物质过多(有时是复杂样品中的一些杂质,不能通过过滤离心去除),可尝试用不同的溶剂(溶解性好)慢慢冲洗。
如果样品过滤不当或样品沉淀在色谱柱上导致一些颗粒杂质堵塞色谱柱,除了试图找到合适的溶剂冲洗,只能考虑反冲洗,一般不建议反冲洗色谱柱,因为可能对色谱柱造成很大的损坏,所以反冲洗是死马当活马医生的最后手段,必须小心使用。做好样品预处理,使用预柱或在线过滤器是保护色谱柱的好方法!