气相色谱柱前衍生化的常见方法

衍生技术是通过化学变化将样品中难以分析和检测的目标化合物定量转化为另一种易于分析和检测的化合物可以通过后者的分析和检测进行定性和定量分析。

柱前衍生条件

首先，如果要在色谱中应用柱前衍生化，其衍生反应应应满足以下条件：

1.反应迅速.定量进行，反应重复性好，反应条件不苛刻，操作方便；

2.反应选择性高，最好只与目标化合物反应，即反应具有专一性；

3.衍生反应产物只有一种，副产品和过多的衍生化试剂不影响目标化合物的分离和检验；

4.衍生化试剂易得，实用性好。

常见的气相色谱衍生反应

1.酯化衍生方法

（1）甲醇法：有机酸和甲醇在催化剂环境中加热，发生酯化反应，产生有机酸甲酯。三氟化硼一般用作催化剂，三氟化硼一般进入甲醇制备酯化剂，由于加热过程，有一定的风险，现在也有商业三氟化硼甲醇溶液可以直接购买和使用。

（2）重氮甲烷法：重氮甲烷能与有机酸反应产生有机酸甲酯，释放氮气。该方法简单有效，反应速度快，转化率高，副作用少，不引入杂质，但应在非水介质中进行。虽然反应条件柔和，但重氮甲烷不稳定，具有爆炸性.有毒，在制备和使用时要特别小心。此外，酚羟基在常温下可与重氮甲烷发生反应，但在0℃避免酚羟基反应。

（3）三氟乙酸酐法：在三氟乙酸酐的存在下，有机酸和酸能反应生成酯，更适合酯化空间阻力大的有机酸、醇或酚。

（4）其他酯化方法:有时为了提高方法的灵敏度和选择性，需要制备甲酯以外的酯。方法类似于甲酯化方法，可以使用重氮乙烷.重氮丙烷.重氮甲苯取代重氮甲烷制成相应的酯，这些实际性能稳定.爆炸性小。三氟化硼丙醇.丁醇或戊醇溶液与有机酸反应也可以产生相应的丙酯.丁酯或戊酯。

2.酰化衍生法

酰化能降低羟基.氨基.硫基的极性提高了这些化合物的色谱性能，增强了这些化合物的挥发性，增加了一些易氧化合物的稳定性。当酰化引入含有卤离子的酰基时，也可以改善使用ECD探测器的灵敏度。常用的酰卤化试剂有酰卤化试剂.酸酐和反应活性酰化物。

(1)乙酰化法:标准乙酰化法是将样品溶于氯仿中，与乙酸酐、乙酸在50℃反应2-6h，真空出去留下试剂。乙酸钠也可以作为碱催化剂，乙酸酐可以作为乙酰化试剂进行乙酰化反应，用于糖分析。.三甲胺.甲基咪唑也可用作偏碱催化剂。乙酰化反应一般在非水介质中进行，但乙酰化时可在溶液中进行。

(2)多氟酰化法:常用的多氟化试剂是三氟乙酰（TFA）.五氟丙酰（PFP）和七氟丁酰（HFB），其活性是TFA>PFP>HFB。TFA和PFP衍生物挥发性强，衍生物挥发性强HFB的衍生物ECD灵敏度高。多氟酰化反应时间不仅取决于多氟酰化试剂的活性，还取决于目标化合物的活性。在大多数情况下，氟酰化反应不需要溶剂，但在某些前提下也需要溶剂，有时还需要部分碱催化剂。

3.卤化衍生法

在目标化合物中引入卤原子ECD提高检测灵敏度，提高挥发性和稳定性，常用的卤化衍生方法如下：

（1）卤素法：卤素直接作为衍生化学试剂处理样品，卤素的作用是祝福或替代

（2）卤化氢法：常见卤化氢法：常见卤化氢法：HCl和HBr衍生化试剂与不饱和链或与羟基发生替代反应

（3）N-溴代丁二酰亚胺（NBS）法：NBS它是一种选择性很强的卤化衍化试剂，能使烯丙位氢原子发生溴代反应