色谱柱什么时候该换新柱？判断依据是什么？

色谱工作者经常遇到这样的问题。什么时候换色谱柱？色谱柱的塔板数量能反映色谱柱的状态吗？确定一个色谱柱应该是“退休”标准，从经验来看，当色谱柱的塔板数量降低到新柱的百分比时，就会觉得色谱柱不能再使用了？如何判断你的实验室里的色谱柱能不能再使用？判断依据应该是什么？

我相信每个色谱工作者都会关注分辨率。分辨率是检查色谱柱分离特定样品质量的水平指标。色谱的核心任务是使每个峰完成分离。我们需要在日常工作中获得合理的峰宽窄峰，以获得较低的检测限制（这不再是问题，现在色谱柱可以满足这一要求）。

更好的方法是利用压力、分辨率和峰值混合指标来检查色谱柱的状态。测量压力是最容易的。一般来说，我们确定的色谱方法应满足以下要求：使用新柱时，柱压不应高于2500psi，在任何情况下，压力都不超过30000psi。虽然现代液相色谱系统可以在更高的压力下使用，但由于高压而产生的系统消耗和泄漏问题将非常严重。当压力超过3万时psi考虑更换进样器和色谱柱之间的0.5mm孔径在线滤芯。如果更换滤芯后压力仍然很高，色谱柱的滤芯或色谱柱就会被污染，这提醒我们更换柱子。据统计，超过60%的色谱柱因压力过大而损坏。

分辨率是我们调查色谱柱的一个至关重要的指标。只要两种成分能得到基线分离，分析物的定量就不会有问题。对于对称的高斯峰，1.5分辨率即可获得基线分离；若分辨率为5；Rs在1.7至2.0之间更好。如果峰尾严重，则需要更高的分辨率。使用分辨率作为色谱柱评价指标的优点是我们可以直观地看到相邻峰的分离。

调查色谱柱质量的另一个标准是峰形拖尾状态。制造商检测报告的峰形特别漂亮，但这并不意味着色谱柱分析了实际样品的情况。实际样品中总是含有或多或少导致峰形拖尾的成分。最值得一提的是含有氮原子的化合物，它们与硅胶框架上分散的硅羟基紧密结合。色谱柱使用时间越长，键合相流失，拖尾越严重。然而，拖尾状态的变化并不像分辨率的变化那样立即可见。基于此，最好设置一个拖尾因子的上限。例如，美国药典规定拖尾因子不超过1.8。

确定色谱柱“抛弃”标准的最佳时间是当我们开发分析方法或进行方法认证时。一般来说，在开发分析方法的过程中，你会测试几个色谱柱，分析足够的实际样品，你知道当分离下降时会发生什么。我专注于在开始时使用一个广泛的类别。我们的经验是：如果您在开始时收紧系统的适用性要求，则很难在方法认证后放宽这一要求。在研究实际样品之前进行系统适用性调查，以确保色谱符合分析师可接受的标准。