导致液相色谱柱失效问题怎样防止气体进入

　　导致液相色谱柱失效的常见问题及解决办法。

　　1筛板堵塞。

　　色谱柱入口筛板堵塞是最常见的问题之一，会导致柱压升高，色谱峰拖尾，塔板数降低等问题，通常分析样品中微粒杂质最右可能堵塞色谱柱入口，因此分析时，需要先过滤或者离心，乳浊或浑浊样品应以0.25μm滤膜处理，也可用针头过滤器过滤，进样器与泵密封垫的磨损也会带入微粒，色谱柱在进样阀与色谱柱之间使用0.25μm或0.45μm的在线过滤器，通常可以避免这类问题。

　　2强保留样品组分。

　　强吸附性的样品组分吸附在柱头填料上，能严重地影响色谱柱寿命，像生物组织或体液的提取物，天然产物等复杂样品，极易造成柱头的污染，相对较纯的样品，一般不会出现这一问题，色谱柱应用中，色谱峰严重拖尾或分裂往往是强保留污染物在柱头吸附的体现。

　　3色谱柱装填不良。

　　装填不良的色谱柱，在色谱柱短时间应用后，填充床的压缩通常使柱头处产生塌陷，导致柱效突然降低，色谱柱的初始评价指标，如塔板数，不对称因子等往往不能很好地表征色谱柱床层的稳定性，这种情绪只能在实际应用中发现。

　　有些色谱柱（如凝胶柱）不允许气泡进入，否则会降低柱效，甚至形成难以去除的小气室，因此，为了防止气泡进入柱，必须使用脱气流动相，并严格按照以下程序安装柱：。

　　A.取下下色谱色谱柱柱入口的密封螺钉观察是否有溶剂泄漏。

　　b.如果溶剂渗出则可以将色谱柱连接到管道上避免气泡进入。

　　C.如果没有溶剂渗出，说明空气已经进入色谱柱的这一端，此时，将色谱柱出口端与进样阀连接，用流动相反方向冲洗色谱柱，以除去色谱柱中的空气，优选用0.2ml/min的小流量冲洗柱，这将导致柱性能的降低，如果溶剂的流速过快或压力的突然增加将导致柱性能的降低。

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