柱长,内径,如250*4.6mm,一般柱长在2—250mm,柱越长,分离度越高,但柱压更高,分离所需时间更长,但分离度与理论塔板数的平方根成正比,所以一昧增加柱长并不是最有效的分离手段,一般情况下,150mm,5um的填料可以提供足够的塔板数。
粒径,影响色谱分离度,粒径越小,分离越快,柱效越高,但柱压力越高,柱容易被污染,导致柱寿命降低,常见分析柱通常使用5um填料,复杂的多组分样品分离一般使用3.5um粒径,更大内径的制备色谱柱通常使用更色谱柱大的粒径,如果固定相选择是正确,但是分离度不够,那么选用更小的粒度的填料是很有用的,3.5um填料填充柱的柱效比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%,然而,3.5um的色谱柱的背压却是5um的2倍,因此如何选择填料粒径需要根据现实情况而定,本文来源于国内领先的第三方检测平台嘉峪检测网,提供检测实验,技术培训,仪器计量校准服务。
孔径,60A,120A,300A等,孔径小,则含孔率高,比表面积大,载碳量高,色谱柱色谱柱填料孔径大小需和分子大小相匹配,保证分子自由进出填料孔并与孔内表面的键合相进行分离分配,通常要求孔径直径是分子直径的3倍以上,一般小分子使用80—120A,大分子使用300A。
颗粒形状,一般有球形和不规则形,当使用黏度较大的流动相时,球形颗粒可以降低柱压,延长色谱柱寿命。
色谱柱的技术都有哪些,比如封尾等,这些技术在应用时都体现在哪里。
色谱柱技术包括填料技术和装柱技术,填料技术自不待言,填料的好坏对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响,装柱技术也没有想象中的这么简色谱柱单,不同固定相,不同粒径,不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密,稳定,均一的柱床,更多是一门艺术,需要经验积累。
国内和国外想比,我认为色谱柱的差距在于:国内公司以前都不会自己开发填料,一般买国外现成填料装柱,买到的填料质量控制权不在自己手里,另外因为装柱历史短,经验积累少,装柱工艺也没有完全达到国外水平,另外,对色谱柱性能很关键的基础材料-----裸硅胶,国产的还不过关,在纯度,粒径和孔径的均一性方面和国外产品相比,差距很大。
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