色谱柱可分为填充柱和开管柱。主要由金属或玻璃制成。有直管、盘管、U管等形状。液相色谱通常用于填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。
色谱是一种分离分析手段,分离是核心,所以分离的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱的要求是柱效率高,选择性好,分析速度快。市场上使用的各种HPLC颗粒填料,如多孔硅胶和以硅胶为基质的键合相。氧化铝。有机聚合物微球(包括离子交换树脂)。多孔碳粒度一般为3.5.7.10μm,柱效理论值可达5~16万/m。一般来说,分析只需要5000个塔板的柱效率;对于同一系列的分析,只需要500个;对于难以分离的物质,可使用高达2000个柱。因此,大约10~30cm的柱长可以满足复杂混合物分析的需要。
柱效应受柱内外因素的影响。为了使色谱柱达到最佳效率,除了柱外死亡体积小外,还应具有合理的柱结构(尽量减少填充床外的死亡体积)和填充技术。即使是最好的填充技术,柱中心和沿管壁的填充也总是不同的。靠近管壁的部分相对松散,易于沟通,流量快,影响洗涤剂的流形,加宽光谱带,即管壁效应。管壁区域的厚度约为管壁的30倍。在一般的液相色谱系统中,柱效应对柱效应的影响远大于管壁效应。
简单地说,色谱柱是色谱仪的分离单元。