手性色谱柱(ChiralHPLColumns)是一种手性固定相(ChiralStationaryPhases),由具有光学活性的单体固定在硅胶或其他聚合物上。手性柱使用中可能出现的常见问题有:
1、在将色谱柱连接到色谱仪之前,必须用合适的溶剂冲洗流路(包括六通阀和定量环)。丙酮.氯仿.DMF(二甲基甲酰胺)残留在杜流路中。DMSO(二甲基亚苁蓉).乙酸乙酯.二氯甲烷.THF(四氢呋喃)等。,以防止破坏手固定相。如果在进样检测中,必须用15%~20%的异丙醇溶液替代进样间隔的洗针液。然后连接色谱柱,不连接探测器,用纯水以0.5ml/min的流速冲洗约20min。(注:流速应小间隔从0升至0.5ml/min)
2、保存手柱时,必须保证柱内无缓冲盐或其它盐残留。
3、样品检测前,如果在工艺中使用丙酮、氯仿、DMF、二甲基亚苁蓉、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF,仔细询问样品样品中可能含有的溶剂。样品应尽可能溶解在流相中,并用0.45μm滤膜过滤。强碱性物质不能用作流相添加剂或溶解样品,因为它会损坏填料中的硅胶成分。
4、连接检测器,然后用纯水以0.5ml/min的流速冲洗约120min。
5、提倡在室温下使用,但柱温一般不超过25℃。
6、以0.5ml/min流速冲洗15%以内的异丙醇溶液约60min。
7、应特别注意流动相和样品溶解溶液的pH值。良好的pH值范围为4.0~7.0,不得超过10.0,以防止硅胶溶解损坏填料,因此pH值不得超过8.0。否则很容易导致手分离不良。色谱峰严重变宽。色谱峰拖尾和分叉。导入强碱性溶液,特别容易导致手柱不可逆损坏,不可再生,完全报废!