色谱柱操作时常见的问题

　　在我们实验室中色谱柱的使用一直是非常重要的，而色谱柱的使用需要一定的知识储备，如果对于色谱柱的使用不了解的话，就很容易出现各种问题，影响实验的进程，那么下面就来看看那色谱柱操作时常见的问题吧！

　　1、装柱

　　柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别，只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。

　　书中写的都是不能见到气泡，我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响，一加压气泡就全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是开裂，甭管竖的还是横的，都会影响分离效果，甚至作废！

　　2、加样

　　用少量的溶剂溶样品加样，加完后将下面的活塞打开，待溶剂层下降至石英砂面时，再加少量的低极性溶剂，然后，再打开活塞，如此两三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗剂，一开始不要加压，等溶样品的溶剂和样品层有一段距离（2～100px就够了），再加压，这样避免了溶剂（如，二氯甲烷等）夹带样品快速下行。

　　3、淋洗剂的选择

　　感觉上要使所需点在Rf0.2~0.3左右的比较好。不要认为在板上爬高了分的比较开，过柱子就用那种极性，如果Rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分开，因为柱子是一个多次爬板的状态。