手性色谱柱的五大常识

　　手性色谱柱（Chiral HPLC Columns）是由具有光学活性的单体，固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相（Chiral Stationary Phases）。那么下面就跟着研创生物一起来看看手性色谱柱的五大常识吧！

　　1、色谱法

　　答：色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。常用的色谱检测有高效液相色谱（HPLC）、超临界色谱（SFC）、模拟移动床（SMB）、气相色谱（GC）、薄层色谱（TLC）等，可根据样品特性选择最合适的色谱检测方法。

　　2、正相&反相

　　答：液相色谱有正相和反相之分。如果固定相的极性大于流动相的极性，就称为正相色谱；如果固定相的极性小于流动相的极性，则称为反相色谱。在正相色谱中，极性小的物质先出峰，极性大的物质后出峰；反相则相反。在大赛璐开发的方法中，通常把以正己烷、醇、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、四氢呋喃等有机溶剂为流动相的方法称为正相方法；把以水（中性、酸性或碱性）和有机溶剂共同作为流动相的方法称为反相方法；把以100%的醇或乙腈做流动相的方法称为极性模式。

　　3、多糖衍生物手性固定相的手性拆分机理

　　答：在多糖衍生物手性固定相上进行的拆分机理目前尚部完全清楚，基于Dalgliesh提出的“三点作用原理”，认为在对映体和CSP之前可能存在π-π作用、偶极-偶极作用、氢键作用及非手性作用（如空间效应）等作用力，这些作用力的综合结果将使两个对映体与固定相之间形成非对映体络合物的稳定性有差异而得到分离，且差异性越大，实现分离的可能性越大。

　　4、评价柱性能的参数

　　答：评价一支柱子性能的参数通常有：色谱峰的保留时间、理论塔板数、拖尾因子和分离度等。大赛璐新柱出厂都严格地经过QC测试，并附有检测报告。这里需要提出的是，因为表观参数不但与柱子本身性能有关，与使用的仪器也有很大关系，不同仪器间的检测结果会有差别。

　　5、手性柱的最大载样量是多少？

　　答：手性柱的最大载样量取决于柱子的尺寸、流动相条件及样品本身的性质（溶解度等），因此很难给出一个明确的值。超出柱子的负载量（进样体积太大或样品浓度过高）会使得峰展宽或峰融合。