色谱柱它是一种分离分析手段,分离是核心因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。
1、用过滤和脱气的流动相(不含缓冲盐)彻底冲洗色谱仪的泵和管路,务必使系统中不含气泡。
2、根据色谱柱上所标示的流动相流向,将色谱柱入口与泵端管路相连,柱出口不连。
3、将泵的流速设为0.1mL/min或更低,流速缓慢地.上升到正常流速(t>5min)。
4、当溶剂从色谱柱出口端自由流出时,将流速设为0,把柱出口与检测器端的管路相连。
5、用10-30倍柱体积的流动相、正常流速平衡色谱柱。
6、氨基柱、氰基柱既可在正相环境下使用,也可在反相环境下工作。当需要从反相变为正相或正相变为反相时,需要用20-30倍柱体积的THF作为过渡溶剂冲洗系统,否则易使泵的单向阀堵塞,出现压力异常的现象。
为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果,应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头,如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱,建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况,避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。