手性分析方法开发有哪些？

　　手性分析方法开发过程中，根据化合物的结构特点或者是进行初步的开发尝试，确定了影响分离有效性的关键因素如色谱柱的类型以及流动相的种类以及操作模式之后，就需要对是否需要使用添加剂以及哪一种添加剂做出选择，一些其他的操作条件诸如流速，色谱柱柱温等进行优化，以此获得良好的分离效果。

　　1、色谱柱温度的影响

　　如我们所知，温度在HPLC方法开发中占据举足轻重的地位，在范式方程中表达为传质阻力项，温度越高，对于流动相而言其粘度越小(如下表乙醇的粘度随温度的变化)，而仪器背压也就越低。更重要的是，升高温度减小了传质阻力，溶质在两相之间的分配速率亦会随之增加，色谱柱的理论塔板高度降低，色谱柱的柱效亦会增加。

　　因此增加色谱柱的温度，可以提高色谱柱的柱效，体现在色谱峰上，峰形更加尖锐，峰宽降低，并一般多伴随色谱峰的容量因子减小；降低色谱柱的温度，则色谱峰峰形变钝，峰宽增加，并一般多伴随容量因子增加。

　　而对于选择性因子以及拖尾因子而言，需要具体情况具体分析，分别对待。此外，不同的手性液相色谱柱所允许的操作温度范围不同，在方法开发的时候，注意不要超过色谱柱所耐受的温度范围，以免损伤色谱柱，导致使用寿命减短。

　　2、有机溶剂中痕量水的影响

　　在正相HPLC操作模式中，我们常使用正己烷、正庚烷作为非极性洗脱剂，乙醇、异丙醇等醇类作为极性洗脱剂，而有机醇类流动相在开瓶之后，会吸收空气中的水分，使得有机溶剂中混入一些痕量的水，而这些痕量的水，有时候会对手性分析方法的开发带来干扰(有时负面影响，有时正面影响)，甚至影响分析方法开发的进程以及分析方法的转移，特别是对于涂覆型的多糖衍生物的手性色谱柱。

　　选择了合适的色谱柱，流动相的组成以及操作模式只是手性分析方法开发成功的必要条件，还需要对色谱仪器的操作条件进行优化，如流动相中的添加剂的种类以及添加量，流动相的流速的大小，溶解样品所用的溶剂等，均对分析方法主要关注点如分离度，拖尾因子，保留时间产生很大的影响。